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PCR仪试验的假阳(阴)性扩增现象探究

发布时间: 2021-11-22  点击次数: 11次
   PCR仪已成为分子生物学、医学、食品工业、司法科学、生物技术、环境科学、微生物学、临床诊断、流行病学、遗传学、基因芯片、基因检测、基因克隆、基因表达等领域广泛应用的一种仪器。在进行试验时若出现的假阳(阴)性扩增和假阴性扩增现象该怎么去分析?
  1.假阳性扩增
  这是扩增系统受到污染的表现,应通过检查排除污染源。首先考虑是否为试剂污染,可将试剂分装好直接置于PCR仪中扩增进行判断。其次要考虑是否为实验室污染,可更换所用的移液器、吸咀管(离心管)等,将试验中的关键步骤转移到一个新的环境中,判断是否为实验室污染。如果是则需要对整个实验室及实验器材彻底清洗处理,保持良好的通风、清洁等。此外,还要考虑是否为采样污染,一般表现为一批结果阳性率很高,一批结果阳性率又下降很多,如此反复。解决方法为尽量使用一次试管及吸咀取样。
  2.假阴性扩增
  首先要考虑是否为仪器故障,仪器应正常运转,尤其要注意加热温度及各管间的差异是否符合实验要求,是否出现误差等。其次要考虑是否为试剂失效或无效引起,使用有效的试剂。
  PCR仪是利用DNA聚合酶用于扩增特定的DNA片段,对特定基因做体外大量合成,可以将一段基因复制为原来的百亿至千亿倍。利用安捷伦特有的酶融合技术,梯度PCR仪可为您获得更快、更好结果;其可灵活配备96和384孔加热模块并具优异的梯度功能,用于加速实验方案开发。
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